组培生产中常见问题
两次培养基用的配方都一样,为什么一个凝固的特好,一个就凝固不了?
培养基的凝固与否无外乎有下列几种情况:
1、琼脂批次有变,没有做批次试验,沿用以前的用量造成不足。
2、大量元素重复加入,或大量元素母液配制时出错。
3、pH值调的过低,或有活性炭高压灭菌时间过长,造成蔗糖分解量剧增,影响培养基的pH值降低较多。
4、加入新的天然附加物,或附加物过多。

酒精的70%和75%都是可以的,但往往由于桶装酒精的浓度达不到95%,这样按照70%的配制就达不到要求了,因此我们一般是桶装按照75%的配,瓶装则按照70%的配。
大型灭菌器在灭菌的时候总会出现个别瓶子破裂的现象,请问什么原因?是温度过高,压力过大,还是内部冷热不均造成的呢?
高压灭菌造成玻璃瓶的破裂,特别是大型灭菌装置,最主要还是在放气冷却时造成的。究其原因,应该是在放气时,由于容积较大,压力在不同位置(内外部)的变化速度并不相同,致使瓶内与瓶外的压力差距较大,如果是封口膜,表现的可能就是塑料膜的破裂。
初代培养时,外植体出现发白,慢慢枯死,是什么原因?
外植体的初代培养出现这种情况,是比较好理解的。大田植物材料离体以后,进入不同环境中继续生存代谢,需要一个过渡。
首先,植物材料要吸收培养基的养分,不再是根吸收,盐类浓度相对于离体的植物材料的吸收能力可能是过量的,植物材料褪色就是叶绿素形成受阻和细胞代谢受阻,另外培养基养分供应的有效性滞后,以及植物材料本身内含物向培养基的流失等等。建议在初代培养阶段 先采用空白培养。