双缩脲试剂检测蛋白质基本原理是啥？

双缩脲是由两分子结构尿素溶液缩合反应而成的化学物质，将尿素溶液加温到180度，则两分子结构尿素溶液缩生成一分子双缩脲，并释放一分子氨。
双缩脲在碱性溶液里能与硫代硫酸钠反映造成红紫色络离子，此化学反应称之为双缩脲反应。
蛋白质分子中包含许多和双缩脲构造类似的肽键，因而也可以起双缩脲反应，产生红紫色络离子。
该基本原理普通高中时期不规定把握，了解反映状况就可以。

双缩脲试剂是一种用以评定蛋白的剖析化学药品。它是一种偏碱的含铜标准溶液，呈深蓝色，由0.1g/mL氢氧化钠溶液或三氯化铁溶液，0.01g/mL硫代硫酸钠和酒石酸钾钠配置而成。

双缩脲试剂原是用于检验双缩脲，因为蛋白质分子中包含许多与双缩脲构造类似的肽键，因而也可以与碘离子在碱性溶液中产生双缩脲反应。当底物中带有肽键时，标准溶液中的铜与活性多肽孤电子对，络离子呈蓝紫色。可根据酶活性测定剖析浓度值，在紫外线可见光谱中的光波长为540nm。评定反映的敏感度为5-160mg/ml。
双缩脲试剂中真的起的作用的是硫代硫酸钠，而三氯化铁溶液只是是因为给予偏碱自然环境，因而它可被别的碱，如氢氧化钠溶液所替代。向实验试剂中添加碘酸钾，会增加实验试剂的使用期限。酒石酸钾钠的效果是维护反映产生的络离子不被进行析出变成沉积，进而使实验试剂无效。